возникновение PCR R3002 Transcriptase обратного золота 10000U бесцветное
Подробная информация о продукте:
Место происхождения: | Китай |
Фирменное наименование: | GDSBio |
Сертификация: | / |
Номер модели: | R3002 |
Оплата и доставка Условия:
Количество мин заказа: | 1 сумка |
---|---|
Упаковывая детали: | небольшой пакет или большая часть распределяют или OEM |
Время доставки: | дни 8work |
Условия оплаты: | L/C, D/A, D/P, T/T, западное соединение, MoneyGram |
Поставка способности: | 100 сумка/сумок в день |
Подробная информация |
|||
Кот. Нет.: | R3002 | Концентрация: | 10,000U |
---|---|---|---|
Возникновение: | бесцветный | Группа: | Обратные реагенты PCR Transcriptase |
Деятельность: | Пропуск | Возможность амплификации: | / |
Печатание логотипа: | С печатанием логотипа | Пакет перехода: | Упаковка |
Производственная мощность: | 100 сумка/сумок в день | Условия хранения: | Магазин на -20°C |
Высокий свет: | PCR Transcriptase обратного золота,PCR Transcriptase обратного 10000U,transcriptase обратного 10000U |
Характер продукции
Обратный Transcriptase R3002 золота (10,000U)
Обратный Transcriptase золота
Для пользы исследования только
Компоненты
Компонент | R3001 (2 000 U) | R3002 (10 000 U) |
буфер золота 5 × | μl 100 | μl 500 |
Обратный Transcriptase золота (200 U/μl) | μl 10 | μl 50 |
Хранение
Этот реагент должен быть сдержан на -30~15°C.
Описание
Обратный Transcriptase золота новое обратное transcriptase полученное in vitro молекулярным развитием основанным на обратном Transcriptase M-MLV (рНКазы H-). Первую стренгу cDNA можно синтезировать на обратном Transcriptase золота 37~55°C. имеет продвинуть значительно улучшенные чувствительность, характерность, термическую стабильность и полувыведение, которое очень соответствующее для обратной транскрипции шаблонов РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ со сложной вторичной структурой. Обратный Transcriptase золота имеет более сильную полимерность и способность расширения, могущие понадобиться для синтеза длинного cDNA и конструкции большого количества без сокращений библиотеки cDNA.
Определение блока
Поли (Ра)·Oligo (dT) использовал как шаблон/праймер. На 37°C на минута 10, количество энзима необходимо, что добавило 1 dTTP nmol как кислот-неразрешимое вещество было определено как 1 блок деятельности (u).
Проверка качества
Обнаружение выпарки Exonuclease: Одно-сели на мель pmol, который субстрат ДНК 200 u этого продукта и 50 был инкубирован на 37°C для 16 h, и диапазон электрофореза ДНК не изменил после электрофореза СТРАНИЦЫ denaturation.
Обнаружение выпарки эндонуклеазы: 200 u из этого продукта и 0,3 μg ДНК pBR322 были инкубированы на 37°C для 4 h, и диапазоны электрофореза плазмид не были изменены электрофорезом геля агарозы.
Обнаружение выпарки рНКазы: продукт 200 u и 1 μg РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ 293 клеток были инкубированы на 37°C на минута 30, и диапазон электрофореза РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ был неизменн электрофорезом геля агарозы.
Обнаружение выпарки ДНК E.coli: нуклеиновая кисловочная выпарка в 60 u была обнаружена qPCR Escherichia Coli gDNA-специфическим TaqMan, и выпарка генома Escherichia Coli была чем 10 экземпляров.
Функциональное обнаружение 1: энзим 200 u был добавлен к обратной системе транскрипции, 1 РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА HeLa клеток μg полная была использована как шаблон, Oligo (dT) 23 как праймер, и реакция была проведена на 50°C для продукта cDNA 45 min.1/10 была принята для амплификации PCR гена VIN. Электрофорез геля агарозы с пятнать EB показал одиночный диапазон 4,6 кб.
Функциональное обнаружение 2: энзим 200 u был добавлен к обратной системе транскрипции, 1 РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА HeLa клетки страницы полная была использована как шаблон, Oligo (dT) 23 как праймер, и реакция была проведена на 50°C для продукта cDNA 30 min.1/10 была принята для амплификации PCR гена GAPDH. Электрофорез геля агарозы с пятнать EB показал одиночный диапазон 550 bp.
Функциональное обнаружение 3: клетки 500 ng HeLa подытоживают РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ как шаблон, Oligo (dT) 23 VN как праймер, реакция 50°C для продукта cDNA 45 min.1/10 были приняты для амплификации PCR гена Polε. Электрофорез геля агарозы, EB пятная, одиночный диапазон 7,1 кб (Общее руководство-богатый) можно увидеть.
Дела внимание
Предотвратите загрязнение рНКазы
Пожалуйста держите экспириментально область чистый. Чистые перчатки и маски должны быть несены во время деятельности. свободный от РНКаз обеспечит для центробежных трубок, капающ подсказки и другие потребляемые вещества из пипетки используемые в эксперименте.
Выбор праймеров
Следовать эксперимент PCR
Если шаблон eukaryotic начала, то Oligo dT вообще предпочтен, спаренный с 3' поли кабель eukaryotic mRNA для максимального выхода без сокращений cDNA.
Праймеры Джин специфические (GSP) имеют самую высокую характерность. Однако, в некоторых случаях, GSP использовал для реакции PCR не может эффектно направить синтез первой стренги cDNA. в этот момент, обратная транскрипция можно переделать используя Oligo dT или случайные hexamers.
Случайные hexamers имеют самую низкую характерность, и всю РИБОНУКЛЕИНОВУЮ КИСЛОТУ, включая mRNA, rRNA, и tRNA, смогло быть использовано как шаблоны для случайных hexamers. Случайные hexamers можно использовать как праймер когда зона мишеней имеет сложную вторичную структуру или высокое содержание ОБЩЕГО РУКОВОДСТВА, или когда шаблон prokaryotic и польза Oligo dT или Джин-специфических праймеров (GSP) не может эффектно направить синтез cDNA.
Следовать эксперимент qPCR
Oligo dT смешал со случайными hexamers привел в такой же эффективности синтеза cDNA в каждом регионе mRNA, помогающ улучшить подлинность и повторимость количественных результатов.
Dongsheng Biotech предлагает различную серию продуктов для того чтобы помочь вам достигнуть успеха PCR. Для энзимов, наша полимераза Taq, полимераза ДНК HS Taq, полимераза ДНК полимеразы, Pfu ДНК FS Taq и полимераза ДНК Pfu сплавливания обеспечивают высококачественное, эффективный, представление PCR чувствительности. Мы также имеем длинную полимеразу ДНК Taq для длинного представления PCR.